摘要
一起绵羊痘的诊断及病原分离鉴定绵羊痘（Sheeppox, SP）是由绵羊痘病毒(Sheeppoxvirus, SPPV)引起绵羊的一种急性、热性、高度接触性传染病。SPPV 是痘病毒科（Poxviridae），山羊痘病毒属（Capripoxvirus）的成员，主要侵害绵羊，其中以羔羊最为易感，能够引起感染部位皮肤和黏膜发生增生性病变，临床上以在感染动物唇、乳房、会阴、尾根以及皮肤无毛少毛处发生丘疹、痘疹、脓疱为特征。目前绵羊痘广泛流行于全世界的多个国家和地区，我国内蒙古、辽宁、青海等多个养羊省区也有本病发生的相关报道。即使在无继发感染的情况下，绵羊痘死亡率仍可达 10～20%。因此该病的发生流行严重阻滞我国养羊业的健康发展，并给养羊业造成严重的经济损失。
2012 年 9 月，辽宁锦州某养羊户饲养的 130 只绵羊中，先后有 30 只在唇、乳房、会阴以及皮肤无毛少毛处出现不同程度的增生性病变，最初局部皮肤出现红斑，逐渐变为丘疹、水疱和脓疱，最后破溃结痂。此外，在疾病初期，病羊体温持续上升，最高时可达 41℃。根据该病的发生情况及临床症状，初步诊断为绵羊痘。为了进行确诊，本研究通过病理组织学观察、电镜观察、细菌学检测以及 PCR 检测等方法从病理学和病原学角度进行系统的分析。
剖检可见，在病羊皮肤、肺脏、瘤胃等部位出现灰白色的痘疹结节。病理组织学观察可见，皮肤棘细胞增生，部分棘细胞胞浆内出现有粉红色、圆形嗜酸性病毒包涵体；肺脏出现间质性肺炎变化，肺支气管黏膜上皮细胞、肺泡上皮细胞增生，出现化生现象；此外，肝脏发生脂肪变性。将病料研磨上清液进行电镜负染观察，可见卵圆形的病毒粒子；PCR 扩增获得 SPPV 特有的 P32 基因片段；此外，细菌学检测结果排除了混合感染的可能性。在证实该病病原为 SPPV 后，本研究利用原代胎羊肾细胞进行病原分离，结果显示，在盲传至第 4 代时细胞出现变圆，核固缩等典型的细胞病变现象；收集细胞病变液进行电镜负染观察，可见有典型的痘病毒粒子。综合该病流行特点、临床症状、病理变化以及实验室诊断结果，证实该病的发生原因为 SPPV 感染。本研究不仅为绵羊痘病毒分子生物学特性的研究奠定基础，同时也将为对该病的诊断、免疫预防和治疗提供重要的理论依据。
关键词：绵羊痘，病原学，病理学，分离鉴定
