运城818位患者的外周血染色体核型分析

　　1 资料与方法

　　1.1 资料 总结分析自 2008 年 5 月至 2013 年 5 月期间来我院生殖科、妇产科、儿科、内分泌科、外院门诊及本院住院患者等，共计 818 例患者，这些患者主要临床表现为先天愚型、原发闭经、智力低下、发育落后、反复流产史、不良孕产史、不孕不育性腺发育异常及外周血染色体异常查父母的等。计数资料采用 3χ2检验，P< 0.05 为差异有统计学意义。

　　1.2 方法 每个患者抽取外周血 2.5 ~ 3.0ml,经肝素钠抗凝后，按照我院遗传室制定的外周血淋巴细胞培养方法、染色体制备、G 显带、行染色体核型分析，每例标本核型计数至少 20 个分裂相，分析不少于 5 个核型，异常则加倍计数和分析。按照人类细胞遗传学国际命名体质（ISCN2009）标准进行核型分析诊断。

　　2 结果

　　818 位患者的外周血染色体核型分析结果，共检出染色体异常 222 例，其中染色体异常核型 84 例（见表 1），占染色体染色体异常的 37.83%,染色体异常核型中染色体数目异常 70 例、平衡易位 7 例、缺失 2 例、der 3 例、环状染色体 2 例 ;染色体多态性变异 138 例，占染色体异常的 62.17%（见表 2），与文献报道相同。

　　3 讨论

　　3.1 818 位患者的外周血染色体核型分析中，共检出 222例染色体异常，其中 64 例为 21- 三体综合征患者，47,XX（XY）游离型 60 例，易位型 4 例，临床特征主要为智力低下，发育迟缓、特殊面容等。21- 三体综合征是引起小儿智力低下的重要原因，在新生儿中发病率是 1/700,产生的机制是由于配子在减数分裂时发生了染色体不分裂导致，与母龄高、放射、病毒感染、化学药物因素密切有关。

　　2 例 Turner 综合征，由于减数分裂过程中遗传物质丢失的量不同，而临床表现亦不一致，临床表现为身材矮小、原发闭经、生长智力落后，应早期遗传学诊断，从而争取尽早在青春期前及时用性激素治疗，减少负面影响。4 例47,XXY,即 Klinefelters 综合征是无精症及严重少弱畸精症患者最为常见的染色体病[1],也称先天性睾丸发育不全或者原发性小睾丸症。由于正常男性 X 染色质为阴性，而克氏征有一条 X 染色质为阳性，具有活性，故睾丸小或隐睾，精曲小管萎缩并呈玻璃样变性，不能产生精子，因而不育，在不育症男性中占 1/10.2 例 inv（9），他的可生育 1/4 正常、1/4 携带、2/4 重复，缺失片段所含基因的致死作用，使得半数配子形成出现障碍，致使婚后多年不孕，月经期长，早期流产，分免出倒位携带者。2 例 r 型染色体，又叫着丝粒环（centricing）发生率约为 1/25000,一半以上为近端着丝粒染色体，主要临床表现为 :出生体重低、小头、小眼、塌鼻梁、耳位低、畸形、通贯掌、不同程度智力障碍和生长障碍。环状染色体所造成的危害程度与成环过程中丢失遗传物质的多少和特殊基因片段丢失情况密切相关[2].患者表型高度多样性，可为正常表型或某种畸形伴有语言障碍、精神发育迟缓和智力低下 ;也有伴有先天性心脏病和癫痛的报道[3],患者致畸因素为细菌、病毒、化学诱变剂等因素 ;其二在受精卵首次卵裂后，胚胎受到某种因素干扰使其长、短臂末端断裂，形成环状染色体。

　　3.2 平衡易位 :本文染色体平衡易位 7 例，临床表现为流产、胚胎停育、不良孕产史等。平衡易位携带者的频率为 1/500 ~ 1/1000,他们生育染色体异常儿的可能性为50% ~ 100%[4].导致染色体平衡易位的原因有两种 :其一有父母遗传而来，其二是两性配子形成过程中或者在精子表2 染色体多态性变异138例46,XX,dir dup（9） （q12;q21.2） 1 胚胎停育46,XY,Y ≤ 21 56精液不液化 , 活动力低 ,成活率大约 30%, 胚胎停育 , 不良孕产史46,XY,Y ≥ 18 46 不孕不育46,XY,Y ≤ 21,13ps+ 1 不良孕产史46,XX,9qh+ 2 流产46,XX,13ps+ 2 流产 , 胚胎停育46,XY,13p- 1 流产46,XX,14ps+ 1 流产46,XY,15ps- 1 胚胎停育46,XX,15p+ 4 习惯性流产46,XX,18p+ 1 原发闭经46,XX,21p+ 11 不孕 , 胚胎停育46,XX,22ps+ 8 不良孕产史46,XX,inv（9）（p11 q12） 1 流产46,XX,inv（9）（p13 q13） 2 胚胎停育 , 流产或卵子形成后和受精前多种因素共同作用结果。非同源染色体之间平衡易位携带者在配子形成过程中，生殖细胞在减数分裂时，通过同源染色体间的配对至少形成 18 种类型配子，1/18 正常合子、1/18 易位携带者、16/18 均为部分三体，部分单体或单体，单体并三体型患者，不能正常生育，而导致流产、死胎、死产、畸胎等[5]同源染色体易位，1/4正常，1/4 携带，2/4 不正常。

　　两条染色体发生断裂后相互交换无着丝粒的短片，形成的两条新衍生染色体，没有片段增加或减少，也没有断点基因的破坏这种易位称平衡易位。这种易位最常见的是结构畸变，平衡易位携带者生殖细胞在减数分裂时产生大量不平衡配子，可导致胚胎反复自然流产、胚胎停止发育、生育畸形儿、不育等。一般来说，不平衡染色体片段越小，所含基因越小，畸形胎儿存活的可能性越大。当染色体片段处于不平衡状态时，基因组也随之失去平衡而导致胚胎或胎儿生长发育障碍 ;染色体上基因的分布随不同的染色体及其部位的不同而不同，两条染色体间的易位，当易位片段长短的不同时，也会导致不同的妊娠结局。

　　3.3 本文的染色体多态有 Y ≥ 18,46 例 ;Y ≤ 21,57 例 ;9 号重复、倒位 3 例 ;p+,ps+,qh+,32 例，主要表现在D、G 组随体增加或随体柄增长，或次缢痕区的增加主要是异染色质的变异会影响着丝粒的功能，导致胚胎发育障碍，染色体不分离和三体的形成[6].

　　一般而言，染色体上的多态区是另一条同源染色体上相应区长度的 2 倍或 3 倍以上多态性，主要表现在异染色质和编码 rRNA 的核仁组织区，表现为异染色质的增加和多份重复的 18S 和 28S rRNA 基因及其编码的核糖体蛋白。　常根据显微镜观察 DNA 为多态区，主要是非编码的高度重复序列，不含结构基因，没有转录活性。

　　越来越多的资料表明，富含 DNA 重复序列的异染色质并非完全是惰性或者与临床表现无关的。异染色质在着丝粒功能方面起着至关重要的作用，是姐妹染色单体和染色体分离所必需的[7],在细胞分裂的同源染色体配对时，染色体多态部分可能造成同源染色体配对困难，影响细胞分裂从而导致胚胎发育障碍，致使流产、胚胎死亡或子女染色体异常[8].Yqh+,即通常所称的大 Y（Y ≥ 18 号染色体）或Y染色体长臂增加，本文占多态染色体的5.62%（46/818）。

　　长臂异染色质区 DY21 的 DNA 序列的过度重复，与某些有粒分裂发生错误有关，可能产生剂量效应或微小变异，干扰了相邻常染色质区与精子生长和发育有关基因功能的正常发挥，从而导致精子形成障碍引起不良妊娠[9].大 Y 染色体多态性与不育，少精症以及精神疾患 Noonan 氏综合征等关联[10],还有报告以为细胞在冷热、缺氧等应激状态下，包括 9qh+ 在内的结构异染色质的转录活性功能被激活，产生热休克蛋白（HSP），而 Y 长臂也有类似的热休克转录因子（HSFY），并与精子发生有关[11].

　　3.4 小 Y 染色体 :本文是从细胞水平检测出 Y ≤ 21 号染色体 57 例，占多态染色体的 6.96%（57/818）。 小 Y 染色体可能会伴随 Y 染色体长臂常色质区的微小缺失，而 Yqh-部分定位于 Yq11.23 的近中远端，与精子生成相关，并称之为无精子因子（azoospermia factor,AZF），包含 AZFa、AZFb、AZFc 3 个区域[12],大约 10% ~ 18% 的无精或者重度少精的男性原发不育与 AZF 缺失有关[13].Yq11 区微缺失是导致生精障碍的重要因素。在 Y ≤ 21 的不育男性 AZF 区的缺失率为 10% ~ 55% 不等。Y 染色体微缺失的基因型在中国汉族不育男性 AZFc 缺失占全部缺失的60.38% 为缺失热点区，AZFa 缺失导致唯支持细胞综合征（临床表现为无精症），AZFb 完全缺失导致精子成熟障碍，AZFc 缺失表现为从正常到无精症的多种表型[14].小 Y 不育患者 AZF 缺失是热点区域，可作为无精或重度少弱精患者的重点筛查区域。目前对于 Yqh- 的临床效应尚不明确，研究表明其与自然流产、死胎及生殖异常有关[15],特别是AZFc 区缺失的患者的精子数目有进行性下降的趋势，甚至发展为无精，故及早将其精液冷冻保存，以备辅助生育所需。

　　因此，进行 Yqh- 的 AZF 微缺失检测，为合理选择移植胚胎提供依据，减少出生缺陷，促进优生优育有重要意义。

　　参考文献：
　　[1] 吕军华，刘菲予，俞剑飞，40 例男性性染色体异常核型分析 [J].中华医学遗传学杂志，2006,23 :703.
　　[2]Moore CM,Heller RH.Thomas GH.Developmental.abnormalitiesassocaited with a ring chromosome 6[J].J Med Genet,1973,10 :299-303.