蓝莓(Vaccinium ashei),杜鹃花科越橘属,多年生落叶或常绿灌木。蓝莓果实富含多种维生素,在水果中其花青苷活性最高,易被人体吸收,对眼睛有良好的保健作用,还富含丰富的钙、铁、磷等矿质元素[1],具有防止脑神经衰老、增强心脏功能、明目及抗癌等独特功效,国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一,誉为“浆果之王”[2]。
蓝莓的新品种选育手段主要依附于常规杂交育种,随着现代科技的不断发展,更多的蓝莓育种手段应运而生,比如:分子标记技术和转基因技术等。蓝莓种子有较强的休眠特性,对发芽造成很大的影响[3]。且蓝莓种子体积小,直播发芽率低,不易成活。成苗后,苗弱小,不易炼苗。采用组织培养,可以增加种子的发芽率,亦可研究探索打破蓝莓种子休眠规律的环境条件,有利于保护资源,提高经济价值。
目前,有关蓝莓茎段组织培养的经验报道很多,但蓝莓种子的组织培养以及低温处理、机械处理和培养基配方对发芽率的影响的研究很少。所以,这次试验将在以往研究的基础上,就低温、机械处理和培养基配方对蓝莓种子发芽率的影响进行研究,筛选出适合蓝莓种子萌发的最佳组合。为生产上提供优良的实生种苗和加快蓝莓苗木的繁殖提供技术参考。
1 材料与方法
1.1试验材料
试验所用充分成熟、饱满的蓝莓种子采自辽东学院农学院园艺实训基地蓝莓园。将种子分成若干小包,用塑料袋包好放入冰箱冷藏,记录冷藏时间。
1.2试验内容和方法
将低温储藏的蓝莓种子放入无菌瓶中,加入95%的酒精灭菌6~8s,然后将酒精倒出,加入0.1%氯化汞灭菌6~8min,用无菌水进行清洗6~7次,无菌纸上滤干待用。
1.2.1不同低温储藏时间发芽率试验
从蓝莓植株上摘取成熟果实,收集饱满种子,分别低温贮藏五周、六周、七周、八周,同一天接种到1/3MS培养基上进行培养,每瓶10粒,每处理10瓶,三次重复。40d后调查不同处理发芽率。
1.2.2刻分播种与完整播种发芽率试验
取低温贮藏五周的种子,采用刻分种子与完整种子接种到1/3MS培养基上进行培养,每瓶10粒,每处理10瓶,三次重复。40d后调查不同处理发芽率。
1.2.3不同培养基的发芽率试验
取低温贮藏五周的种子,分别接种到1/3MS、1/3MS+NAA0.01mg/L、1/3MS+NAA0.01mg/L+ZT0.1mg/L、1/3MS+NAA0.05mg/L和1/3MS+NAA0.05mg/L+ZT0.5mg/L等五种培养上,40d后调查不同处理发芽率。
2 结果与分析
2.1不同低温储藏时间对发芽率的影响
2.1.1方差分析
对不同低温储藏时间发芽率调查数据进行方差分析,见表1。
2.1.2差异显着性检验
对发芽率平均值进行差异显着性检验,见表2。
表2说明,低温储藏八周发芽率最高,达10.8%,而低温储藏五周的发芽率仅为3.7%。低温储藏八周与六周、五周均达到了极显着差异。低温储藏八周与低温储藏七周达到了显着差异,即低温储藏八周发芽率最高;低温储藏七周发芽率较高;低温储藏六周、五周发芽率最低。
2.2刻分播种与完整播种对发芽率的影响
2.2.1方差分析
对刻分播种与完整播种发芽率数据进行方差分析,见表3。
表3表明,处理间发芽率差异极显着。
2.2.3差异显着性检验
对发芽率平均值进行差异显着性检验,见表4。
表4说明,经过刻分处理的发芽率达11.9%,而完整接种的种子发芽率仅有3.7%。刻分播种与完整播种达到了极显着差异,即刻分接种发芽率最高。
2.3不同培养基对发芽率影响
2.3.1方差分析
对不同培养基发芽率数据进行方差分析。见表5。
表5表明,处理间发芽率差异极显着。
2.3.2差异显着性检验
对发芽率平均值进行差异显着性检验,见表6。
表6说明,处理E发芽率最高,达到了16.9%,处理E与C、D、B、A均达到了极显着差异;处理C与处理D、处理B与处理A、处理B与处理D差异不显着,处理A发芽率最低为3.7%。
即1/3改良的MS培养基为基本培养基,NAA浓度为0.05mg/L、ZT浓度为0.5mg/L发芽率最高。
3 结论
试验结果表明,不同低温储藏时间、刻分播种与完整播种、不同的培养基配方,均对蓝莓种子组织培养的发芽率有影响。低温储藏八周发芽率最高;低温储藏七周发芽率较高;低温储藏六周、五周发芽率最差。对蓝莓种子进行刻分发芽率较高,不刻分发芽率较低。1/3改良的MS培养基为基本培养基,NAA浓度为0.05mg/L、ZT浓度为0.5mg/L种子发芽率最高,其他各处理发芽率较低。
通过本试验得出蓝莓种子组织培养的最佳处理组合为低温储藏八周、采用种子刻分播种、使用1/3改良MS+NAA0.05mg/L+ZT0.5mg/L配方的培养基。
参考文献:
[1]张铭浩,杨晶,许孝瑞.新兴果树蓝莓的发展前景与栽培技术[J].落叶果树,2011(2):20-22.
[2]乌凤章,王贺新,陈英敏,等.我国兔眼蓝莓生理生态研究进展[J].北方园艺,2006(3):48-49.
[3]张华微,栾雨时,张匀.促进越橘种子发芽的研究[J].北方园艺,2006(5):41-42.
